ung防止什麼汙染
最佳答案 pcr。標本間交叉汙染、PCR試劑的汙染、PCR擴增產物汙染、實驗室中克隆質粒的汙染。1、標本間交叉汙染:標本汙染主要有收集標本的容器被汙染,或標本放置時,由於密封不嚴溢於容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉汙染;標本核酸模板在提取過程中,由於吸樣槍汙染導致標本間汙染。
pcr。標本間交叉汙染、PCR試劑的汙染、PCR擴增產物汙染、實驗室中克隆質粒的汙染。
1、標本間交叉汙染:標本汙染主要有收集標本的容器被汙染,或標本放置時,由於密封不嚴溢於容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉汙染;標本核酸模板在提取過程中,由於吸樣槍汙染導致標本間汙染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導致彼此間的汙染。
2、PCR試劑的汙染:主要是由於在PCR試劑配製過程中,由於加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被PCR核酸模板汙染。
3、PCR擴增產物汙染:這是PCR反應中最主要最常見的汙染問題。因為PCR產物複製量大(一般為1013複製/ml),遠遠高於PCR檢測數個複製的極限,所以極微量的PCR產物汙染,就可造成假陽就可形成假陽性。最可能造成PCR產物汙染的形式是氣溶膠汙染。在空氣與液體面摩擦時就可形成氣溶膠,在操作時比較劇烈地搖動反應管,開蓋時、吸樣時及汙染進樣槍的反覆吸樣都可形成氣溶膠而汙染。據計算一個氣溶膠顆粒可含48000複製,因而由其造成的汙染是一個值得特別重視的問題。
4、實驗室中克隆質粒的汙染:在分子生物學實驗室及某些用克隆質粒做陽性對照的檢驗室,這個問題也比較常見。因為克隆質粒在單位容積內含量相當高,另外在純化過程中需用較多的用具及試劑,而且在活細胞內的質粒,由於活細胞的生長繁殖的簡便性及具有很強的生命力。其汙染可能性也很大。
聚合酶鏈式反應(PCR)是一種用於放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA複製,PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。因此,無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸,只要能分離出一丁點的DNA,就能用PCR加以放大,進行比對。這也是微量證據的威力之所在。由1983年美國Mullis首先提出設想,1985年由其發明了聚合酶鏈反應,即簡易DNA擴增法,意味著PCR技術的真正誕生。到如今2013年,PCR已發展到第三代技術。1976年,中國科學家錢嘉韻,發現了穩定的Taq DNA聚合酶,為PCR技術發展也做出了基礎性貢獻。PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經常是60°C左右)時引物與單鏈按鹼基互補配對的原則結合,再調溫度至DNA聚合酶最適反應溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5-3)的方向合成互補鏈。基於聚合酶製造的PCR儀實際就是一個溫控裝置,能在變性溫度,復性溫度,延伸溫度之間很好地進行控制。